Vergleich RNAseq - Microarrays

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Vergleich von Microarray und RNASeq

Erläutern Sie die Gemeinsamkeiten und Unterschiede von RNASeq und Microarray.

Vergleich von Microarray und RNASeq
Eigenschaft Microarray RNASeq
Kosten in etwa gleich (Microarrays sind unter Umständen etwas billiger)
Methode Transcriptomics
Analyse von RNA
Vorgang bis zur Herstellung der cDNA gleich
Prinzip Hybridisierung Hochdurchsatz Sequenzierung
Auflösung einige bis 100 bp Einzelbase
Hintergrundrauschen hoch gering
Dynamischer Bereich bis 100fach > 8000fach
Isoformen teilweise ja
Benötigte RNA-Menge hoch gering

Isoformen: Varianten eines Gens/RNA/Proteins - Bspw. fehlt beim Splicen ein Exon --> andere Funktion

Zum Nachlesen: https://www.chemie.de/lexikon/Isoform.html

Dynamischer Bereich: Bereich, indem die Genexpression unterschiedlicher Proben innerhalb eines Versuches gemessen werden kann. Beim Microarray ist dies beispielsweise limitiert durch das Hintergrundrauschen einerseits und die Signalsättigung andererseits. Deswegen ist der dynamische Bereich hier kleiner als bei RNASeq, die durch viele diskrete, digitale reads die Expression in einem deutlich größeren Bereich quantifizieren kann.